細(xì)胞實(shí)驗(yàn)步驟：

一、細(xì)胞復(fù)蘇

1.將10ml移液管、移液槍、1ml槍頭、50ml離心管、T25培養(yǎng)瓶、酒精燈、廢液缸等物品放入超凈工作臺(tái)，紫外燈照射30min后再通風(fēng)30min；

2.預(yù)熱培養(yǎng)基；

3.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺(tái)；

4.將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出；

5.放入一次性手套于37℃水浴鍋中快速晃動(dòng)使其融化；

6.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺(tái)；

7.吸取9ml培養(yǎng)基到50ml離心管中；

8.用1ml槍頭吸取解凍的細(xì)胞懸液于離心管中；

9.1000r/min,離心5min；

10.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺(tái)；

11.吸棄上清液；

12.吸取1ml培養(yǎng)基重懸細(xì)胞，將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到培養(yǎng)瓶內(nèi)，補(bǔ)加適量培養(yǎng)基，輕輕晃動(dòng)培養(yǎng)瓶使細(xì)胞分布均勻，并做好標(biāo)記；

13.在顯微鏡下觀察復(fù)蘇的細(xì)胞密度及狀態(tài)；

14.將細(xì)胞放回二氧化碳培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)。

商品屬性：

產(chǎn)品介紹

KYSE-180細(xì)胞培養(yǎng)基由團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化，經(jīng)過長期測試，本產(chǎn)品可保持KYSE-180細(xì)胞優(yōu)良的生長狀態(tài)。

本產(chǎn)品中已包含KYSE-180細(xì)胞生長所需的各種成分，無需添加任何成分，可直接用于KYSE-180細(xì)胞的培養(yǎng)。

產(chǎn)品主要成分

RPMI-1640 基礎(chǔ)培養(yǎng)基                                  445 mL

特級胎牛血清                                                  50 mL

運(yùn)輸和保存

運(yùn)輸：放置于含有生物冰袋的保溫箱中低溫運(yùn)輸

保存方法：2℃～8℃，避光，保存2個(gè)月；?

注意事項(xiàng)：

僅限科研用。

培養(yǎng)體系中的一些組分是對人體健康有害的物質(zhì)，請不要用暴露的皮膚接觸培養(yǎng)體系的液體和有培養(yǎng)體系的液體殘留的容器內(nèi)部；這部分有害物質(zhì)的濃度和危害性都較低，如有接觸，立即用自來水沖洗即可。

細(xì)胞培養(yǎng)步驟：

?細(xì)胞復(fù)蘇?：

從液氮罐中取出凍存細(xì)胞，迅速放入37℃水浴中解凍。

解凍后，將細(xì)胞轉(zhuǎn)移到含有新鮮培養(yǎng)基的培養(yǎng)皿中，輕輕搖動(dòng)使細(xì)胞均勻分布。

放入37℃、5%CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

?細(xì)胞換液?：

吸除或倒掉培養(yǎng)皿內(nèi)的舊培養(yǎng)液。

加入PBS緩沖液，輕輕漂洗細(xì)胞，以去除懸浮在細(xì)胞表面的碎片，重復(fù)幾次。

加入新的培養(yǎng)基。

?細(xì)胞傳代?：

當(dāng)細(xì)胞長到80%~90%時(shí)，進(jìn)行傳代。

吸除或倒掉瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液，加入PBS緩沖液漂洗。

加入消化液，輕輕搖動(dòng)使消化液流遍所有細(xì)胞表面。

將培養(yǎng)瓶放入37℃培養(yǎng)箱中靜止幾分鐘，觀察細(xì)胞變化。當(dāng)細(xì)胞間隙增大后，加入含有血清的培養(yǎng)液終止消化。

吹打細(xì)胞使其成為懸液，轉(zhuǎn)移到離心管中離心。

棄上清，加入適量的細(xì)胞培養(yǎng)液重懸細(xì)胞。

按比例分裝到新的培養(yǎng)皿中，補(bǔ)加新鮮培養(yǎng)基。

做好標(biāo)記，放入37℃、5%CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

?細(xì)胞凍存?：

選擇對數(shù)生長期的細(xì)胞進(jìn)行凍存。

將細(xì)胞轉(zhuǎn)移到離心管中離心，棄上清。

加入適量的凍存液（如90%的培養(yǎng)基+10%的DMSO），輕輕吹打重懸細(xì)胞。

將細(xì)胞轉(zhuǎn)移到冷凍保存管中，標(biāo)記后放入程序降溫盒，再放入-80℃冰箱凍存。幾小時(shí)后或過夜轉(zhuǎn)至液氮罐保存。

公司正在出售的產(chǎn)品：

小鼠TH糖蛋白(THP)ELISA pcr檢測試劑盒

Rat carbonic anhydrase (CA) ELISA Kit 大鼠酶(CA)試劑盒

HumanInsulin,INSELISAKit 人胰島素(INS)pcr檢測試劑盒分裝

HumanclusterOfdiffereiation,CDl4試劑盒人CD14分子(CDl4)試劑盒規(guī)格：96T/48T

組蛋白脫乙酰化酶2(HDAC2)活性比色法定量試劑盒20次

Humaheumatoidahritisassociatednuclearaigen,RANAELISAKit人抗類風(fēng)濕關(guān)節(jié)核抗原(RANA)試劑盒規(guī)格：96T/48T

大鼠組織蛋白酶L(CTSL)試劑盒 ，英文名： CTSL ELISA Kit

Mouse ai glucoprotein 210 (gp210) ELISA Kit 小鼠抗核膜糖蛋白210抗體(gp210)試劑盒

Mouseadrenomedullin,ADMELISAKit 小鼠腎上腺髓質(zhì)素(ADM)pcr檢測試劑盒分裝

CLIAKitforHumanmammaliaargetofrapamyein,mTORELISAKit人雷帕霉素靶蛋白

透射電鏡(TEM)制片處理脫水液10毫升

ELISAKitACA大鼠抗中性粒/中心體抗體

兔素(Renin)ELISAKit   ELISA

兔子胰島素樣生長因子2(IGF-2)ELISAKit   ELISA

兔子胰島素樣生長因子1(IGF-1)ELISAKit   ELISA

兔子胰島素(INS)ELISAKit   ELISA

復(fù)制因子A蛋白2

上皮鈉離子通道蛋白γ/γENaC抗體

NP重組甲型流感 H3N2 (A/Hong Kong/1/1968) 核蛋白 (Nucleoprotein / NP) Protein

PEDF (pigment epithelium-derived factor 0.5mgPEDF (pigment epithelium-derived factor) 色素上皮源性因子(多肽抗原)

CPB2重組人 Carboxypeptidase B2 / CPB2 蛋白 Protein

HCST Protein Human 重組人 HCST / DAP10 蛋白 (

KYSE-180 細(xì)胞專用培養(yǎng)基PEDF (pigment epithelium-derived factor 0.5mgPEDF (pigment epithelium-derived factor) 色素上皮源性因子(多肽抗原)

HCST Protein Human 重組人 HCST / DAP10 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)

NP重組甲型流感 H3N2 (A/Hong Kong/1/1968) 核蛋白 (Nucleoprotein / NP) Protein

CD200 Protein Human 重組人 CD200 / OX-2 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽)

CPB2重組人 Carboxypeptidase B2 / CPB2 蛋白 Protein