兔原代骨膜干細胞專用培養(yǎng)基

兔原代骨膜干細胞培養(yǎng)基由團隊精心優(yōu)化，經(jīng)過長期測試，本產(chǎn)品可保持兔原代骨膜干細胞優(yōu)良的生長狀態(tài)。

本產(chǎn)品中已包含兔原代骨膜干細胞生長所需的各種成分，無需添加任何成分，可直接用于兔原代骨膜干細胞的培養(yǎng)。

注意事項

僅限科研用。

培養(yǎng)體系中的一些組分是對人體健康有害的物質(zhì)，請不要用暴露的皮膚接觸培養(yǎng)體系的液體和有培養(yǎng)體系的液體殘留的容器內(nèi)部；這部分有害物質(zhì)的濃度和危害性都較低，如有接觸，立即用自來水沖洗即可。

復蘇

1) 將恒溫水浴鍋中的水預熱到 37℃；

2) 準備一支 15ml 離心管，加入 5ml 含 10%FBS 的培養(yǎng)基，放入 37℃水浴鍋中預熱；

3) 戴上護目鏡，厚毛線手套后，從液氮罐中取出要復蘇的細胞，盡快轉(zhuǎn)入 37℃恒溫水浴鍋中

復溫晃動凍存管以提高復溫速率；

4) 將融化了的凍存管中的細胞吸入事先準備的離心管中，混勻后，1000rpm 離心 5min；

5) 準備一個 T-25 培養(yǎng)瓶，寫上細胞名稱、日期，再加入 4ml 培養(yǎng)基；

6) 離心完成后棄去上清，用 1ml 培養(yǎng)基重懸細胞后，轉(zhuǎn)入 T-25 細胞培養(yǎng)中，混勻后轉(zhuǎn)入

CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)靜置。

傳代 （細胞傳代建議一傳二）

1) 當細胞匯合度達到 85%以上時，可進行傳代。

2) 在生物安全柜內(nèi)，打開培養(yǎng)瓶瓶口，收集瓶內(nèi)的培養(yǎng)基；

3) 向培養(yǎng)瓶內(nèi)加入 3ml 無菌的 1×PBS 后，水平放置培養(yǎng)瓶，使PBS 能夠浸潤到培養(yǎng)瓶底面上所有的面積，吸棄 PBS；

4) 向瓶內(nèi)加入消化液 1ml，浸潤底面后放入 37℃ CO2培養(yǎng)箱中孵育 1~2min；

5) 孵育完成后在倒置顯微鏡下觀察細胞是否變圓飄起，若全部消化下來則直接向培養(yǎng)瓶內(nèi)加入2ml 含 10%FBS 的培養(yǎng)基中，將懸液吸入 15ml 離心管；

① 準備一個無菌的 15ml 離心管，加入 2ml 含 10%FBS 的培養(yǎng)基；

② 將消化下來的細胞吸入①中的離心管內(nèi)中和（避免吹打③）；向之前消化的培養(yǎng)瓶中加入 1ml 繼續(xù)消化 2min 左右，輕拍培養(yǎng)瓶，95%左右細胞脫。

6) 1000rpm 離心 5min；

7) 準備兩個新的 T-25 培養(yǎng)瓶，各加入 4ml培養(yǎng)基。

8) 離心完成后，棄上清，用 2ml 培養(yǎng)基重懸離心細胞，將重懸后的細胞轉(zhuǎn)入 2 個 T-25 培養(yǎng)瓶，每個培養(yǎng)瓶各 1ml；

9) 水平放置培養(yǎng)瓶，震蕩混勻后，將培養(yǎng)瓶置于 37℃，5%CO2培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)。 

凍存 （細胞凍存建議每瓶 T25 凍一支）

1）~6）參照傳代步驟

7）離心完成后，棄上清，用 1mL 凍存液重懸細胞沉淀，然后轉(zhuǎn)入 1.8ml 凍存管中；

8）將凍存管轉(zhuǎn)入填充滿異丙醇的程序降溫盒中，之后轉(zhuǎn)入-80℃冰箱中過夜降溫；

9）第二天，取出降溫完成的序降溫盒中的凍存管，盡快轉(zhuǎn)入液氮罐中保存。

?無菌操作?：細胞培養(yǎng)需在無菌環(huán)境下進行，使用前需對超凈工作臺進行紫外線照射滅菌，定期清潔培養(yǎng)箱。實驗人員需更換工作服、鞋套，戴口罩、手套。

?器材滅菌?：玻璃器皿、金屬器械等可采用高壓蒸汽滅菌，塑料制品則多選擇環(huán)氧乙烷滅菌或購買已滅菌產(chǎn)品。

?試劑選擇?：所用培養(yǎng)液、血清、緩沖液等試劑應無菌、無污染，使用前需進行無菌檢測。不同細胞對培養(yǎng)液成分要求有差異，應按細胞類型選擇合適培養(yǎng)液。

?培養(yǎng)條件?：多數(shù)哺乳動物細胞適宜培養(yǎng)溫度為37℃，偏差應控制在±0.5℃。培養(yǎng)箱應保持良好密封性，定期檢查氣體濃度與流量，細胞培養(yǎng)通常需5%CO2以維持培養(yǎng)液pH值穩(wěn)定。培養(yǎng)箱內(nèi)濕度應保持在95%左右。

?日常觀察?：每天在顯微鏡下觀察細胞形態(tài)、生長狀態(tài)與培養(yǎng)液顏色變化。

?定期檢測?：定期對細胞進行支原體、細菌、真菌等污染檢測。

小鼠前列腺素F(PGF)ELISA pcr檢測試劑盒

Human thrombin aithrombin complex (TAT) ELISA Kit 人抗復合物(TAT)試劑盒

HumanArginase,ArgELISAKit 人精酶(Arg)pcr檢測試劑盒分裝

GuineapigTumornecrosisfactorα,TNF-α試劑盒豚鼠壞死因子α(TNF-α)試劑盒規(guī)格：96T/48T

真菌/酵母細胞染色質(zhì)免疫沉淀分析(CHIP)試劑盒10次

MouseBonemorphogeneticprotein4,BMP-4ELISAKit小鼠骨成型蛋白4(BMP-4)試劑盒規(guī)格：96T/48T

大鼠細胞間粘附分子2(ICAM2)試劑盒 ，英文名： ICAM2 ELISA Kit

Mouse somatostatin (SS) ELISA Kit 小鼠(SS)試劑盒

MouseCyclicguanosinemonophosphate,cGMPELISAKit 小鼠環(huán)0酸鳥苷(cGMP)pcr檢測試劑盒分裝

CLIAKitforHSP-40(HumanHeatShockProtein40)ELISAKit人熱休克蛋白40

細胞MAPKAPKINASE3激酶活性定量試劑盒(A/B/C)20次

ELISAKitIL-17大鼠白介素17

小鼠0酸肌醇3激酶試劑盒   小鼠0酸肌醇3激酶試劑盒      小鼠0酸肌醇3激酶試劑盒，，來源：試劑盒（進口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠0酸肌醇3激酶試劑盒、小鼠0酸肌醇3激酶eisa試劑盒

小鼠0酸化細胞外信號調(diào)節(jié)激酶試劑盒   小鼠0酸化細胞外信號調(diào)節(jié)激酶試劑盒      小鼠0酸化細胞外信號調(diào)節(jié)激酶試劑盒，，來源：試劑盒（進口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠0酸化細胞外信號調(diào)節(jié)激酶試劑盒、小鼠0酸化細胞外信號調(diào)節(jié)激酶eisa試劑盒

小鼠細胞蛋白試劑盒   小鼠細胞蛋白試劑盒      小鼠細胞蛋白試劑盒，，來源：試劑盒（進口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠細胞蛋白試劑盒、小鼠細胞蛋白eisa試劑盒

小鼠可溶性試劑盒   小鼠可溶性試劑盒      小鼠可溶性試劑盒，，來源：試劑盒（進口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠可溶性試劑盒、小鼠可溶性eisa試劑盒

纖維母細胞生長因子4抗體

GLIS1蛋白抗體

IL4R重組大鼠 IL4R / Il4ra 蛋白 (Fc 標簽) Protein

DNA-PKcs peptide DNA依賴蛋白激酶催化亞基多肽抗原 0.5mgDNA-PKcs peptide DNA依賴蛋白激酶催化亞基多肽抗原

USP5重組人 USP5 / ISOT 蛋白 Protein

CSAG1 Protein Human 重組人 CSAGE / CSAG1 蛋白 (Fc 標簽)

TNFRSF10B Protein Mouse 重組小鼠 TRAIL R2 / CD262 / TNFRSF10B 蛋

兔原代骨膜干細胞專用培養(yǎng)基DNA-PKcs peptide DNA依賴蛋白激酶催化亞基多肽抗原 0.5mgDNA-PKcs peptide DNA依賴蛋白激酶催化亞基多肽抗原

CSAG1 Protein Human 重組人 CSAGE / CSAG1 蛋白 (Fc 標簽)

IL4R重組大鼠 IL4R / Il4ra 蛋白 (Fc 標簽) Protein

TNFRSF10B Protein Mouse 重組小鼠 TRAIL R2 / CD262 / TNFRSF10B 蛋白

USP5重組人 USP5 / ISOT 蛋白 Protein