細(xì)胞實(shí)驗(yàn)步驟：

一、細(xì)胞復(fù)蘇

1.將10ml移液管、移液槍、1ml槍頭、50ml離心管、T25培養(yǎng)瓶、酒精燈、廢液缸等物品放入超凈工作臺(tái)，紫外燈照射30min后再通風(fēng)30min；

2.預(yù)熱培養(yǎng)基；

3.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺(tái)；

4.將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出；

5.放入一次性手套于37℃水浴鍋中快速晃動(dòng)使其融化；

6.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺(tái)；

7.吸取9ml培養(yǎng)基到50ml離心管中；

8.用1ml槍頭吸取解凍的細(xì)胞懸液于離心管中；

9.1000r/min,離心5min；

10.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺(tái)；

11.吸棄上清液；

12.吸取1ml培養(yǎng)基重懸細(xì)胞，將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到培養(yǎng)瓶內(nèi)，補(bǔ)加適量培養(yǎng)基，輕輕晃動(dòng)培養(yǎng)瓶使細(xì)胞分布均勻，并做好標(biāo)記；

13.在顯微鏡下觀察復(fù)蘇的細(xì)胞密度及狀態(tài)；

14.將細(xì)胞放回二氧化碳培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)。

商品屬性：

小鼠原代骨骼肌微血管內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基由團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化，經(jīng)過長期測試，本產(chǎn)品可保持小鼠原代骨骼肌微血管內(nèi)皮細(xì)胞優(yōu)良的生長狀態(tài)。

本產(chǎn)品中已包含小鼠原代骨骼肌微血管內(nèi)皮細(xì)胞生長所需的各種成分，無需添加任何成分，可直接用于小鼠原代骨骼肌微血管內(nèi)皮細(xì)胞的培養(yǎng)。

注意事項(xiàng)：

僅限科研用。

培養(yǎng)體系中的一些組分是對人體健康有害的物質(zhì)，請不要用暴露的皮膚接觸培養(yǎng)體系的液體和有培養(yǎng)體系的液體殘留的容器內(nèi)部；這部分有害物質(zhì)的濃度和危害性都較低，如有接觸，立即用自來水沖洗即可。

細(xì)胞培養(yǎng)步驟：

?細(xì)胞復(fù)蘇?：

從液氮罐中取出凍存細(xì)胞，迅速放入37℃水浴中解凍。

解凍后，將細(xì)胞轉(zhuǎn)移到含有新鮮培養(yǎng)基的培養(yǎng)皿中，輕輕搖動(dòng)使細(xì)胞均勻分布。

放入37℃、5%CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

?細(xì)胞換液?：

吸除或倒掉培養(yǎng)皿內(nèi)的舊培養(yǎng)液。

加入PBS緩沖液，輕輕漂洗細(xì)胞，以去除懸浮在細(xì)胞表面的碎片，重復(fù)幾次。

加入新的培養(yǎng)基。

?細(xì)胞傳代?：

當(dāng)細(xì)胞長到80%~90%時(shí)，進(jìn)行傳代。

吸除或倒掉瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液，加入PBS緩沖液漂洗。

加入消化液，輕輕搖動(dòng)使消化液流遍所有細(xì)胞表面。

將培養(yǎng)瓶放入37℃培養(yǎng)箱中靜止幾分鐘，觀察細(xì)胞變化。當(dāng)細(xì)胞間隙增大后，加入含有血清的培養(yǎng)液終止消化。

吹打細(xì)胞使其成為懸液，轉(zhuǎn)移到離心管中離心。

棄上清，加入適量的細(xì)胞培養(yǎng)液重懸細(xì)胞。

按比例分裝到新的培養(yǎng)皿中，補(bǔ)加新鮮培養(yǎng)基。

做好標(biāo)記，放入37℃、5%CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

?細(xì)胞凍存?：

選擇對數(shù)生長期的細(xì)胞進(jìn)行凍存。

將細(xì)胞轉(zhuǎn)移到離心管中離心，棄上清。

加入適量的凍存液（如90%的培養(yǎng)基+10%的DMSO），輕輕吹打重懸細(xì)胞。

將細(xì)胞轉(zhuǎn)移到冷凍保存管中，標(biāo)記后放入程序降溫盒，再放入-80℃冰箱凍存。幾小時(shí)后或過夜轉(zhuǎn)至液氮罐保存。

公司正在出售的產(chǎn)品：

小鼠0酸葡萄糖變位酶(PGM)pcr檢測試劑盒

Human prealbumin (PA) ELISA Kit 人前白蛋白(PA)試劑盒

Humanmyosinheavychain,MHCELISAKit 人肌球蛋白重鏈(MHC)pcr檢測試劑盒分裝

Humanadeno-associatedvirus,AAV試劑盒人腺相關(guān)病毒(AAV)試劑盒規(guī)格：96T/48T

直腸標(biāo)記K-ras糞便檢測突變巢式分析試劑盒50次

Mousealpha-L-fucosidase,AFUELISAKit小鼠αL巖藻糖苷酶(AFU)試劑盒規(guī)格：96T/48T

大鼠葡萄糖60酸異構(gòu)酶(GPI)試劑盒 ，英文名： GPI ELISA Kit

Mouse plasma alpha granule membrane protein (GMP-140) ELISA Kit 小鼠血漿α顆粒膜蛋白(GMP-140)試劑盒

Ratai-IVIgGaibodyELISAKit 大鼠抗IVIgG抗體pcr檢測試劑盒分裝

CLIAKitforGP-II(HumanGlycogenphosphorylaseII)ELISAKit人糖原0酸化酶同工酶II

細(xì)胞蛋白巰基/結(jié)合巰基含量熒光定量試劑盒20次

Rattissueinhibitorsofmetalloproteinase4,TIMP-4ELISAKit大鼠基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子4(TIMP-4)試劑盒規(guī)格：96T/48T

小鼠角化細(xì)胞生長因子（KGF）試劑盒

小鼠角化細(xì)胞內(nèi)分泌因子(KAF)/雙調(diào)蛋白(AR)試劑盒

小鼠膠質(zhì)細(xì)胞系來源的神經(jīng)營養(yǎng)因子(GDNF)試劑盒

小鼠膠原酶II(CollagenaseII)試劑盒

DISC1 C端抗體

干擾素α8抗體

SIRPA重組大鼠 SIRP alpha / CD172a 蛋白 Protein

DISC1(disrupted in schizophrenia1 0.5mgDISC1(disrupted in schizophrenia1)(CT) DISC1 C端抗原

GALK1重組人 GALK1 / Galactokinase / Galactose kinase 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽) Protein

CYB5R1 Protein Human 重組人 CYB5R1 蛋白

TNFRSF14 Prote

小鼠原代骨骼肌微血管內(nèi)皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基DISC1(disrupted in schizophrenia1 0.5mgDISC1(disrupted in schizophrenia1)(CT) DISC1 C端抗原

CYB5R1 Protein Human 重組人 CYB5R1 蛋白

SIRPA重組大鼠 SIRP alpha / CD172a 蛋白 Protein

TNFRSF14 Protein Mouse 重組小鼠 HVEM / TNFRSF14 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽)

GALK1重組人 GALK1 / Galactokinase / Galactose kinase 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽) Protein